RSV F蛋白预融合构象稳定化：通过S190F和L188Q双突变实现ΔG< -30 kcal/mol，预融合/融合构象比例≥95% 🆔 ID: 300797 ✅ 可用
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mRNA序列优化：密码子优化针对人肺上皮细胞（BEAS-2B）表达系统，GC含量48-52%，避免隐蔽剪接位点 🆔 ID: 300798 ✅ 可用
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LNP配方：SM-102:DSPC:胆固醇:PEG2000-DMG摩尔比50:10:38.5:1.5，粒径75±5nm，PDI<0.15，Zeta电位-20±3mV 🆔 ID: 300799 ✅ 可用
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抗原表达量：转染后24小时RSV F蛋白表达量≥15%总细胞蛋白（Western Blot定量），预融合形式占80%以上 🆔 ID: 300800 ✅ 可用
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免疫原性阈值：小鼠模型中血清中和抗体GMT≥1:5000，BALB/c模型保护效力≥90%（攻毒后病毒载量下降≥2 log10） 🆔 ID: 300801 ✅ 可用
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佐剂系统：50μg 3M-052（TLR7/8激动剂）与10μg MPLA复合佐剂，诱导Th1型应答IFN-γ/IL-4比值≥3 🆔 ID: 300802 ✅ 可用
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mRNA加帽效率：共转录加帽法Cap1结构比例≥98%，2'-O-甲基化率>95%，5'UTR包含Kozak序列GCCACC 🆔 ID: 300803 ✅ 可用
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纳米颗粒包封率：微流控电穿孔技术实现mRNA包封率≥92%，载荷量2-4μg/100μl，4℃储存7天泄漏率<3% 🆔 ID: 300804 ✅ 可用
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靶细胞递送：静脉注射后2小时肺部DC细胞摄取效率≥60%（流式检测CD11c+Siglec-F+细胞群） 🆔 ID: 300805 ✅ 可用
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免疫程序设计：基础免疫2剂（间隔28天），加强免疫1剂（第180天），老年组剂量增加50% 🆔 ID: 300806 ✅ 可用
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蛋白稳定性：预融合F蛋白在PBS缓冲液（pH7.4）中37℃储存7天，构象保持率≥85%（圆二色谱检测） 🆔 ID: 300807 ✅ 可用
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细胞因子谱：接种后第7天PBMC培养上清中IL-12p70≥80pg/ml，IL-10≤50pg/ml，TNF-α≤200pg/ml 🆔 ID: 300808 ✅ 可用
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载体纯度：HPLC检测mRNA纯度>99%，残留模板DNA<5ng/剂量，dsRNA<0.05%（J2抗体ELISA） 🆔 ID: 300809 ✅ 可用
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生产工艺：一次性生物反应器培养HEK293细胞至密度2×10^6 cells/ml，转染效率≥85%（GFP对照） 🆔 ID: 300810 ✅ 可用
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冻干工艺：预冻-45℃保持2小时，一次干燥-30℃/80mTorr，二次干燥25℃/30mTorr，残留水分≤1.5% 🆔 ID: 300811 ✅ 可用
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纳米颗粒稳定性：4℃储存6个月粒径变化<8%，mRNA完整性>88%（凝胶电泳），PEG-脂质氧化<5% 🆔 ID: 300812 ✅ 可用
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免疫持久性：加强免疫后6个月血清中和抗体GMT维持≥1:1000，记忆B细胞频率≥0.5%（ELISPOT） 🆔 ID: 300813 ✅ 可用
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剂量优化：小鼠有效剂量0.1-0.3μg RSV F mRNA，食蟹猴验证剂量1-3μg，人体起始剂量0.5μg 🆔 ID: 300814 ✅ 可用
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T细胞表位：预测RSV F蛋白HLA-A*02:01限制性表位（9-mer），结合亲和力IC50<50nM（NetMHCpan） 🆔 ID: 300815 ✅ 可用
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B细胞表位：X射线晶体学确定PreF蛋白抗原表位（残基190-210），与Palivizumab结合位点重叠≥70% 🆔 ID: 300816 ✅ 可用
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mRNA二级结构：RNAfold计算最小自由能<-18kcal/mol，避免茎环结构阻碍核糖体扫描（ORF区ΔG>-15） 🆔 ID: 300817 ✅ 可用
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佐剂协同：3M-052与MPLA按2:1比例复合，使DC成熟标志物CD80/CD86表达上调3倍（流式检测） 🆔 ID: 300818 ✅ 可用
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载体递送：吸入式递送系统（振动网筛雾化器）实现肺部分布效率≥70%，肺部滞留时间>6小时 🆔 ID: 300819 ✅ 可用
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免疫原性检测：假病毒中和试验检测针对RSV A/B亚型的交叉中和抗体，GMT≥1:2000为保护阈值 🆔 ID: 300820 ✅ 可用
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生产工艺放大：从2L到2000L生物反应器，关键参数（pH7.2-7.6，DO>30%，温度37℃）控制偏差<5% 🆔 ID: 300821 ✅ 可用
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纳米颗粒释放：内涵体逃逸效率>60%（pH5.5条件下DiD标记荧光检测），胞质递送率>85% 🆔 ID: 300822 ✅ 可用
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安全性指标：食蟹猴重复给药（3次）无肺组织病理学改变，BALF中蛋白浓度<150mg/dL 🆔 ID: 300823 ✅ 可用
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蛋白构象：冷冻电镜（cryo-EM）显示PreF蛋白三聚体结构分辨率≤3?，与天然病毒颗粒相似度≥90% 🆔 ID: 300824 ✅ 可用
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mRNA翻译效率：兔网织红细胞裂解物系统中蛋白产量≥1.2μg/μg mRNA，比活性≥90% 🆔 ID: 300825 ✅ 可用
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佐剂剂量：3M-052剂量范围10-50μg，MPLA剂量范围5-20μg，铝佐剂作为对照（100μg AlOH3） 🆔 ID: 300826 ✅ 可用
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