RSV F蛋白预融合构象稳定化：S190F/L188Q双突变使ΔG< -32 kcal/mol，预融合/融合构象比例≥97%（差示扫描量热法验证） 🆔 ID: 301074 ✅ 可用
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mRNA序列优化：针对新生儿免疫系统密码子优化（GC含量49.5%），5'UTR包含CMV增强子+优化Kozak序列（GCCACCATGG） 🆔 ID: 301075 ✅ 可用
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LNP配方：SM-102:DSPC:胆固醇:PEG2000-DMG摩尔比50:10:38.5:1.5，粒径78±3nm，PDI<0.12，Zeta电位-19±2mV（动态光散射检测） 🆔 ID: 301076 ✅ 可用
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抗原表达量：转染后24小时HEK293细胞中RSV F蛋白表达量≥18%总蛋白（Western Blot定量），预融合形式占82%（质谱分析） 🆔 ID: 301077 ✅ 可用
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免疫原性阈值：6-24月龄婴幼儿血清中和抗体GMT≥1:4500（假病毒中和试验），保护效力81%（95%CI 72-88%） 🆔 ID: 301078 ✅ 可用
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佐剂系统：3M-052（12μg）与MPLA（6μg）复合佐剂，诱导Th1型应答IFN-γ/IL-4比值≥3.5（ELISA检测） 🆔 ID: 301079 ✅ 可用
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mRNA加帽效率：共转录Cap1结构比例≥99%（2'-O-甲基化率>96%），5'UTR优化避免隐蔽剪接位点（RNAfold分析） 🆔 ID: 301080 ✅ 可用
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纳米颗粒包封率：微流控电穿孔技术实现mRNA包封率≥93%（qPCR检测游离mRNA），载荷量2.5-3.5μg/100μl（纳米颗粒追踪分析） 🆔 ID: 301081 ✅ 可用
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靶细胞递送：肌肉注射后24小时局部DC细胞（CD11c+HLA-DR+）摄取效率≥65%（流式细胞术） 🆔 ID: 301082 ✅ 可用
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免疫程序设计：2剂基础免疫（间隔30天），6月龄以下婴儿剂量0.5ml（含1.2-1.8μg RSV F mRNA） 🆔 ID: 301083 ✅ 可用
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蛋白稳定性：预融合F蛋白在PBS（pH7.4）中25℃储存14天，构象保持率≥88%（圆二色谱检测） 🆔 ID: 301084 ✅ 可用
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细胞因子谱：接种后第7天PBMC培养上清中IL-12p70≥90pg/ml，IL-10≤45pg/ml，TNF-α≤180pg/ml（多因子检测） 🆔 ID: 301085 ✅ 可用
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载体纯度：HPLC检测mRNA纯度>99.5%（DV200>92%），残留模板DNA<3ng/剂量，dsRNA<0.03%（J2抗体ELISA） 🆔 ID: 301086 ✅ 可用
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生产工艺：悬浮培养HEK293细胞至密度2.5×10^6 cells/ml，转染效率≥88%（GFP对照，流式检测） 🆔 ID: 301087 ✅ 可用
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冻干工艺：预冻-42℃保持3小时，一次干燥-32℃/70mTorr，二次干燥25℃/25mTorr，残留水分≤1.2%（卡尔费休法） 🆔 ID: 301088 ✅ 可用
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纳米颗粒稳定性：4℃储存6个月粒径变化<5%（PDI<0.15），mRNA完整性>89%（凝胶电泳），PEG-脂质氧化<4%（HPLC） 🆔 ID: 301089 ✅ 可用
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免疫持久性：基础免疫后6个月血清中和抗体GMT维持≥1:1200（保护阈值≥1:800），记忆B细胞频率≥0.6%（ELISPOT） 🆔 ID: 301090 ✅ 可用
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剂量优化：新生儿有效剂量0.8-1.5μg RSV F mRNA，婴幼儿验证剂量1.2-2.0μg，人体起始剂量1.0μg（Ⅰ期临床试验） 🆔 ID: 301091 ✅ 可用
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T细胞表位：预测RSV F蛋白HLA-A*02:01限制性表位（9-mer），结合亲和力IC50<45nM（NetMHCpan 4.1） 🆔 ID: 301092 ✅ 可用
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B细胞表位：X射线晶体学确定PreF蛋白抗原表位（残基195-215），与Palivizumab结合位点重叠≥75%（分子对接） 🆔 ID: 301093 ✅ 可用
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mRNA二级结构：RNAfold计算最小自由能<-19kcal/mol，避免茎环结构阻碍核糖体扫描（ORF区ΔG>-16） 🆔 ID: 301094 ✅ 可用
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佐剂协同：3M-052与MPLA按2:1比例复合，使DC成熟标志物CD80/CD86表达上调3.2倍（流式检测） 🆔 ID: 301095 ✅ 可用
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载体递送：肌肉注射后4小时局部NK细胞活化率≥40%（CD69+细胞比例，流式检测） 🆔 ID: 301096 ✅ 可用
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免疫原性检测：假病毒中和试验检测针对RSV A/B亚型的交叉中和抗体，GMT≥1:2200为保护阈值（95%保护效力） 🆔 ID: 301097 ✅ 可用
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生产工艺放大：从2L到2000L生物反应器，关键参数（pH7.3-7.7，DO>32%，温度37℃±0.5）控制偏差<4% 🆔 ID: 301098 ✅ 可用
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纳米颗粒释放：内涵体逃逸效率>62%（pH5.5条件下DiD标记荧光检测），胞质递送率>87%（共聚焦显微镜） 🆔 ID: 301099 ✅ 可用
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安全性指标：婴幼儿临床试验中局部反应（红肿直径≤2cm）发生率<15%，发热（体温≤38.5℃）<10% 🆔 ID: 301100 ✅ 可用
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蛋白构象：冷冻电镜（cryo-EM）显示PreF蛋白三聚体结构分辨率≤2.8?，与天然病毒颗粒相似度≥92%（EM密度图） 🆔 ID: 301101 ✅ 可用
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mRNA翻译效率：兔网织红细胞裂解物系统中蛋白产量≥1.3μg/μg mRNA，比活性≥92%（[35S]-甲硫氨酸掺入法） 🆔 ID: 301102 ✅ 可用
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佐剂剂量：3M-052剂量范围8-15μg，MPLA剂量范围4-10μg，铝佐剂作为对照（75μg AlOH3） 🆔 ID: 301103 ✅ 可用
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